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大肠杆菌 质粒
大肠杆菌
都有
质粒
吗?
答:
质粒
编码非细菌生命所必须的某些生物学性状,如性菌毛、细菌素、毒素和耐药性等。质粒具有可自主复制、传给子代、也可丢失及在细菌之间转移等特性,与细菌的遗传变异有关。但是
大肠杆菌
工程菌自身不带质粒。大肠杆菌中存在质粒不一定都具有抗性基因,但有抗性的大肠杆菌一般都与其具有质粒有关。
大肠杆菌质粒
提取过程中,哪一步最关键?
答:
p1:葡萄糖使悬浮后的
大肠杆菌
不会快速沉积到管子的底部;EDTA是Ca²⁺和Mg²⁺等二价金属离子的螯合剂,其主要目的是为了螯合二价金属离子从而达到抑制DNase的活性;可添加RNase A消化RNA。p2:此步为碱处理。其中NaOH主要是为了溶解细胞,释放DNA,因为在强碱性的情况下,细胞膜...
大肠杆菌质粒
的提取
答:
1、接1%含
质粒
的
大肠杆菌
细胞于2ml LB培养基。2、37℃振荡培养过夜。3、取1.5ml菌体于Ep管,以4000rpm离心3min,弃上清液。4、加0.lml溶液I(1%葡萄糖,50mM/L EDTA pH8.0,25mM/L Tris-HCl pH8.0)充分混合。5、加入0.2ml溶液 II(0.2 mM/L NaOH,1% SDS),轻轻翻转混匀,置于冰...
大肠杆菌质粒
一般有多大
答:
质粒
的大小一般在10kb左右,但是F 因子要大很多。是一个约 100kb 的质粒。它编码60多种参与复制、分配和接合过程的蛋白质(Willetts and Skurray,1987)。虽然F因子通常以双链闭环DNA(1-2个拷贝/细胞)的形式存在,但它可以在
大肠杆菌
染色体中至少30个位点处进行随机整合(Low,1987)。携带F因子的...
大肠杆菌质粒
DNA怎样提取,用什么方法?
答:
碱裂解法:此方法适用于小量
质粒
DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下:1、接1%含质粒的
大肠杆菌
细胞于2ml LB培养基。2、37℃振荡培养过夜。3、取1.5ml菌体于Ep管,以4000rpm离心3min,弃上清液。4、加0.lml溶液I(1%葡萄糖,50mM/L EDTA pH8.0,25mM/L...
请问
大肠杆菌
一定有
质粒
吗?我们用来做转化的DH52有质粒吗
答:
大肠杆菌质粒
DNA的提取 质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术,但提取方法有很多种,以下介绍一种最常用的方法:碱裂解法:此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下:1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基。2、37℃振荡培养...
大肠杆菌
的一种
质粒
仅含某限制酶的一个识别序列,就位于该质粒的lacZ基...
答:
(4)DNA分子中,P存在于①磷酸基团中;在蛋白质中,S存在于④R基团中.故答案为:(1)不含(2)IPTG、X-gal(3)①自连的运载体pUC118
质粒
已转入受体菌,但目的基因没有转入运载体(或说明重组质粒没有导入受体
大肠杆菌
)②重组质粒已导入受体大肠杆菌(4)①④ ...
许多
大肠杆菌
的
质粒
上含有lacz基因
答:
31.(8分)许多
大肠杆菌
的
质粒
上含有lacZ’基因,其编码的产物B-半乳糖苷酶在X-gal和IPTG 存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞,过程如下图。请据图回答:(1)基因工程中,构建基因表达载体的目的...
大肠杆菌
为什么常选为宿主菌用于基因工程??
答:
第二,细菌质粒(游离于细菌等微生物细胞质中的小型环状DNA分子)是基因工程常用的运载体(与目的基因结合的工具),而
大肠杆菌质粒
又是最常用的质粒,因为大肠杆菌质粒上有诸如抗青霉素基因等易于检测的标记基因,并且容易使目的基因在宿主细胞中复制和表达.而最适合大肠杆菌质粒完成使命的场所当然就是它的天然来源...
大肠杆菌
为什么常选为宿主菌用于基因工程?
答:
第二,细菌质粒(游离于细菌等微生物细胞质中的小型环状DNA分子)是基因工程常用的运载体(与目的基因结合的工具),而
大肠杆菌质粒
又是最常用的质粒,因为大肠杆菌质粒上有诸如抗青霉素基因等易于检测的标记基因,并且容易使目的基因在宿主细胞中复制和表达.而最适合大肠杆菌质粒完成使命的场所当然就是它的天然来源...
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